lemon 发表于 2022-11-30 15:10:46

纯化常用的几种紫外波长

1、还原辅酶I或还原辅酶II中由于嘧啶环还原成醌型在340nm处有光吸收。
2、蛋白质紫外吸收的最大波长是280nm。蛋白质在280nm波长处有特征的最大吸收,这是由于蛋白质中有酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸存在的缘故。实质是含共轭双键的苯环氨基酸的特征波长。因此,利用这个特异性吸收,可以计算蛋白质的含量。
3、核酸(DNA,RNA)的最大紫外吸收值在260nm 处。酸、核苷酸及其衍生物的分子结构中的嘌呤、嘧啶碱基具有共轭双键系统,能够强烈吸收250~280nm 波长的紫外光。
4、肽键吸收最大波长215nm处。肽纯度是指相对于所有分析物而言目标肽的数量,即目标多肽相对于杂质的占比。肽纯度可通过HPLC分析确定的,通常在在吸收光波长在220nm检测。肽纯度是影响一个研究项目结果的关键因素,常见的污染物可能在化学合成、培养基或提取和纯化过程中产生。杂质由具有缺失序列、截短序列、不完全脱保护的肽,以及在合成或最终裂解过程中产生的副产物组成。


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